Técnica de PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa)

Tema: Realización de un ensayo de PCR cuantitativa en heces para el diagnóstico de tuberculosis en adolescentes y adultos: un estudio multinacional prospectivo de precisión diagnóstica
Objetivos: Evaluar la precisión diagnóstica y el rendimiento aditivo de un nuevo ensayo de PCR cuantitativa en heces (qPCR) para el diagnóstico de tuberculosis en tres países de África.
Muestra biológica: heces (mínimo 5g)
Tipo de ácido nucleico: ADN circular relajado (4,4 millones de pares de bases)
Extracción del ADN: kit MP FAstDNA for Soil (Mp Biochemicals, Santa Anna, CA, EEUU)
Gen a amplificar: IS6110 M (gen de la tuberculosis) 1361 pares de bases
Tipo de PCR: qPCR en tiempo real

Visualización: Fluorescencia. (La fluorescencia es captada durante los ciclos por el equipo Quant Studio Machine)

Figura 1. Relación entre medidas semicuantitativas del umbral del ciclo regustradas en heces mediante qPCR y Xpert Ultra. Se comparan los resultados de ambas técnicas. Tomado de Kay, Carratala y Mendez (2024)

Bibliografía
1. Kay A, Vasiliu A, Carratala-Castro L, Mtafya B, Mendez Reyes JE, Maphalala N, et al. Performance of a stool-based quantitative PCR assay for the diagnosis of tuberculosis in adolescents and adults: a multinational, prospective diagnostic accuracy study. Lancet Microbe [Internet]. 2024 [citado el 17 de junio de 2024];5(5):e433–41. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38461830/
2. Mycobacterium tuberculosis [Internet]. NCBI. [citado el 17 de junio de 2024]. Disponible en:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/datasets/taxonomy/1773/