Técnicas de hibridación

Uso de Western blot para el diagnóstico de histoplasmosis en pacientes con VIH/SIDA 

La histoplasmosis es una infección fúngica frecuente en pacientes con VIH/SIDA, con altas tasas de morbimortalidad cuando el diagnóstico y el tratamiento se retrasan. La investigación evaluó el papel de Western blot para la detección de anticuerpos contra los antígenos de Histoplasma Capsulatum en muestras de sangre y orina. Los resultados se obtuvieron mediante la visualización de bandas correspondientes a los anticuerpos contra los antígenos H y M. Todos los pacientes que presentaron histoplasmosis pulmonar diagnosticada con anterioridad, también tuvieron resultados positivos en la Western blot. Se concluyó que esta técnica molecular podría ser útil para el diagnostico de histoplasmosis en pacientes con producción de anticuerpos dificultada [1].

Figura 1. Demostración de la reactividad sérica de pacientes contra el antígeno de Histoplasma Capsulatum mediante Wastern blot. Tomado de: Almeida, Muniz y Damasceno (2019).

Bibliografía

1. Almeida MA, Damasceno LS, Pizzini CV, Muniz MM, Almeida-Paes R, Zancopé-Oliveira RM. Role of western blot assay for the diagnosis of histoplasmosis in AIDS patients from a National Institute of Infectious Diseases in Rio de Janeiro, Brazil. Mycoses. 2019;62(3):261-267. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30561870/

Técnica de PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa)

Tema: Realización de un ensayo de PCR cuantitativa en heces para el diagnóstico de tuberculosis en adolescentes y adultos: un estudio multinacional prospectivo de precisión diagnóstica
Objetivos: Evaluar la precisión diagnóstica y el rendimiento aditivo de un nuevo ensayo de PCR cuantitativa en heces (qPCR) para el diagnóstico de tuberculosis en tres países de África.
Muestra biológica: heces (mínimo 5g)
Tipo de ácido nucleico: ADN circular relajado (4,4 millones de pares de bases)
Extracción del ADN: kit MP FAstDNA for Soil (Mp Biochemicals, Santa Anna, CA, EEUU)
Gen a amplificar: IS6110 M (gen de la tuberculosis) 1361 pares de bases
Tipo de PCR: qPCR en tiempo real

Visualización: Fluorescencia. (La fluorescencia es captada durante los ciclos por el equipo Quant Studio Machine)

Figura 1. Relación entre medidas semicuantitativas del umbral del ciclo regustradas en heces mediante qPCR y Xpert Ultra. Se comparan los resultados de ambas técnicas. Tomado de Kay, Carratala y Mendez (2024)

Bibliografía
1. Kay A, Vasiliu A, Carratala-Castro L, Mtafya B, Mendez Reyes JE, Maphalala N, et al. Performance of a stool-based quantitative PCR assay for the diagnosis of tuberculosis in adolescents and adults: a multinational, prospective diagnostic accuracy study. Lancet Microbe [Internet]. 2024 [citado el 17 de junio de 2024];5(5):e433–41. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38461830/
2. Mycobacterium tuberculosis [Internet]. NCBI. [citado el 17 de junio de 2024]. Disponible en:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/datasets/taxonomy/1773/

Alteraciones en la epigenética en el Lupus Eritematoso Sistémico

El rol de la epigenética en enfermedades autoinmunes/inflamatorias

La enfermedad autoinmune/inflamatoria sistémica “Lupus Eritematoso Sistémico” (LES) presenta autoanticuerpos y linfocitos autorreactivos. Si bien la fisiopatología del LES no se comprende por completo, se ha encontrado que existen alteraciones epigenéticas implicadas. Por ejemplo, en los linfocitos T CD4+ se encontraron regiones de hipometilación de ADN en genes que codifican para IL-10 e IL-3. Además, la expresión de micro ARN, en específico miR-21, son factores que contribuyen al aumento de producción de IL-10 [1].

Figura 1. Mecanismos epigenéticos que contribuyen a la desregulación de las respuestas inmunes innatas y adaptativas en el lupus eritematoso sistémico. Tomado de Surace y Hedrich (2019).

Bibliografía

1. Surace AEA, Hedrich CM. The role of epigenetics in autoimmune/inflammatory disease. Front Immunol [Internet]. 2019 [citado el 9 de junio de 2024];10. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31333659/

Alteraciones en la traducción de proteínas

Distintos roles que S6K1 y S6K2 ejercen sobre mTOR en el cáncer de mama

mTOR (mecanicista de rapamicina) es un regulador en la traducción de las proteínas además de desempeñar un papel importante en la tumorigénesis, sin embargo, se encuentra alterado en el cáncer de mama. Se ha visto que la función de mTOR1 esta mediada por la proteína ribosómica S6. A su vez, esta proteína es fosforilada por S6K.

Se descubrió que S6K1 y S6K2 están sobreexpresados en el cáncer de mama. En específico S6K2 se relaciona con la proliferación de células cancerígenas. Mientras que S6K1 interviene en la migración e invasión del cáncer. [1].



Figura 1. La activación del objetivo mecanicista de la rapamicina (mTOR). Tomado de Sridharan S. (2020)








Bibliografía

1. Sridharan, S., & Basu, A. (2020). Distinct Roles of mTOR Targets S6K1 and S6K2 in Breast Cancer. International journal of molecular sciences, 21(4), 1199. Disponible en:https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32054043/